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标题:旋转珠磨大容量实验窜珠磨细胞破碎仪-细胞显微镜

信息分类:站内新闻   作者:yiyi发布   时间:2017-7-3 19:07:15 将本页加入收藏

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正文:

旋转珠磨大容量实验窜珠磨细胞破碎仪-细胞显微镜

    对微生物的破碎过程大约耗时l~5分钟
    旋转珠磨法,:大容量的实验窜珠磨细胞破碎仪通常使用旋转
来代替振动以引起小球运动,通过装备外侧冷却装置以避免大量处
理样本的过热。是一种常用的旋转珠磨匀质机,可以在3~5min内
处理250 ml。的样品,其中细胞浓度可以达到40%。
    尽管之前所提及的细胞破碎仪主要用于微生物,但它们同时也
可以厢于匀质并提取植物和动物组织,对于软组织和硬的或纤维性
的样品均可使州,如皮肤、筋腱或者叶子等、球磨法的提取量通常
大于其他方法,.对于核酸的分离而言,细胞破坏可以在苯酚或异
硫氰酸胍等提取液中进行,这样可以消除核酸酶的影响并提高产鼙
  当应用于聚合酶链式反应(PCR)时,应使用一次性管以避免交叉
污染。在进行选择性匀质时,可以选择不同大小的小珠或不同的搅
动速度。
  细胞裂解的非机械方法酶裂解在酶裂解法中,酶作用于细胞壁上
特定的键,在破坏细胞壁的同时对于细胞的机械损伤是最小的一这
种方法受限于释放细胞周质或表面酶。
    蛋白溶菌酶广泛应用于革兰氏阳性菌原生质球的处理中,如巨
大芽孢杆菌、溶壁微球菌、藤黄八替球菌和粪链球菌。蛋白溶菌酶
与螫合剂一同使用,可片j于特定革兰氏阴性菌细胞壁的部分溶解
,如大肠杆菌、变形杆菌、气杆菌、假单胞菌和红螺菌:裂解消化
反应通常在中性或弱碱性的低渗蔗糖稀释液(0.3~0.5mol/L)等
具有一定渗透压的溶液巾进行,0.1~1.0mg/mL的溶菌酶在30分
钟内可使样品完全变为原生质体。
    与革兰氏阳性菌不同,革兰氏阴性菌的肽聚糖结构对溶菌酶很
敏感。然而,酶却不能透过其外层的膜,l对此需要先将膜去除,
冻融法、乙二胺四乙酸(EDTA)处理均可,某些情况F还可使用多粘
菌素B等抗生素。革兰氏阴性菌肽聚糖的破坏并不能除去其外层膜
,其渗透性的敏感结构会导致原生质球而非原生质体的生成、











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